紫外可見分光光度計是一種常用的實驗室儀器,廣泛應用于化學、生物、醫學和環境等領域。本文將介紹紫外可見分光光度計的基本原理、構造和使用方法。
一、基本原理
利用樣品吸收光的特性來測量其濃度的儀器。在紫外可見區域,不同物質對光的吸收程度不同。當樣品通過光度計時,會通過一個具有單色性能的光源發出的一束光線照射到樣品上,樣品會吸收部分光線,使其透過樣品的光線減少。這部分被吸收的光線量可以通過檢測樣品前后光線強度的變化來計算出來。由此可以推算出樣品中某一特定物質的濃度。
二、構造
通常由以下三個部分組成:光源、單色器和檢測器。
1.光源:該光度計中通常采用氘燈或鎢燈作為光源。
2.單色器:單色器主要用來將光源發出的白光分離成一束具有單色性能的光線。單色器中通常采用光柵或棱鏡作為分離機構,通過旋轉單色器上的光柵或棱鏡,可以選擇一個特定的波長范圍。
3.檢測器:檢測器用于測量樣品前后光線強度的變化。常用的檢測器包括光電二極管和光電倍增管等。這些檢測器可以將光線轉化為電信號,并將其發送到計算機或數顯儀器上進行顯示和記錄。
三、使用紫外可見分光光度計需要注意以下幾個方面:
1.樣品的制備:樣品需要被制備成透明均勻的溶液或懸浮液。如果樣品是固體,則需要先將其溶解或懸浮于適當的溶劑中。
2.手動調節儀器:在進行實驗之前,需要手動調節光源和單色器以選擇適當的波長范圍,并校正零點(即在沒有樣品的情況下測量背景光強度)。
3.放入樣品:將制備好的樣品倒入光路中,并根據需要選擇適當的路徑長度。
4.記錄結果:記錄樣品前后的光線強度差值,并使用標準曲線或計算公式來計算樣品中某一特定物質的濃度。